Minőségi analízis a hepatitis C esetében

Szólj hozzá 9,080

A polimeráz láncreakció - PCR a hepatitis C-re vonatkozó minőségi analízise meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. Laboratóriumi körülmények között vizsgáljuk az RNS szerkezetét, amely tartalmazza a vírust. A C vírus kimutatása esetén meg kell adni egy kezelést, mivel a máj elhanyagolt állapota súlyos következményekkel járhat. A kiváló minőségű PCR-t a helyreállítás után is végezzük, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Rendszeres ellenőrzéshez rendelve. A vérben lévő kórokozó alacsony koncentrációja miatt a PCR (kvalitatív) nem észlel semmit, mert a diagnosztikai rendszer saját érzékenységi küszöbértékekkel rendelkezik. A betegség kezdeti szakaszában vagy az enyhe formában a PCR ultra-diagnosztikát ultraérzékeny berendezéseken végzik.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy hepatitis C vírus RNS) RNS-je maga a májbetegség. A C-vírus a test egészséges sejtjéhez kötődik belélegezve. Idővel, egész testen át terjed, csak a vérbe kell bejutnia. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt dolgoznak, változásokon esnek át, és ettől halnak meg. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál nagyobb a sejtek száma. Idővel olyan veszélyes betegségek kialakulása, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj ilyen típusú vírusfertőzés nem jelentkezhet külsőleg. Évtizedekig vagy évtizedekig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak véletlenszerűen végzett vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozása esetén megvizsgálják az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mivel ez csak indikátor. A pontos képet és további diagnózist az orvos határozza meg.

Ha kész: a kutatásra utaló jelek

A HCV megerősítésénél PCR-analízist végzünk (polimeráz láncreakció). A PCR-vizsgálatok segítenek megtalálni a patogén anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

• a májgyulladás jeleinek észlelése;
• megelőző szűrővizsgálatok;
• kapcsolattartó személyek vizsgálata;
• a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
• a krónikus formában a vírus szaporodási aktivitásának meghatározása;
• a máj cirrhosis;
• hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékos arányát a vírus hordozóihoz a vérben, és a minőségi jelzi a vírus jelenlétét vagy hiányát. A minőség pozitív mutatója (Hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív kutatást igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitelének veszélyével jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony számítások jobban kezelhetők. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. Az interferon terápia esetében PCR-analízist is végeztünk annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív elemzést adnak minden olyan betegnek, aki a vérben található hepatitis C ellenanyagot mutatott. A betegek, akik betegek voltak és visszaálltak, újra be kell tartaniuk a tesztet. Ajánlatos a hepatitis B tesztet elhalasztani, majd pozitív következtetés esetén és hepatitis D esetén. A minőségi szempontból elemzett reakciót egyéb vérvizsgálatokkal együtt is el kell végezni. Az elemzések teljes képet mutatnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredményekből csak pozitív, hepatitis C teszt lesz látható vagy negatív, vagyis egy vírus jelenléte vagy hiánya. Ha a kimenet "észlelhető", akkor a vírus aktív és aktív marad. A "nem észlelt" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval szem előtt kell tartani, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és hogy az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

Különösen érzékeny PCR módszer Ultra hepatitis C még kis mennyiségben is felfedezhető. Fluoreszcens hibridizációs vizsgálatot alkalmaznak, ami sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

• a hepatitis C gyanús rejtett formái;
• A PCR-diagnosztika nem erősítette meg a kórokozót, de vannak antitestek;
• visszanyerés esetén;
• a korai fertőzés kimutatására.

Dekódolás elemzése

A HCV PCR-dekódolása befolyásolja a végső döntést, amikor diagnosztizál, különösen az ultrametod módszerrel. A vizsgálat fő hátránya a minta és az anyagok steril állapotának szigorú betartása. Egy kis eltérés néha pontatlan analitikus következtetéseket mutat, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis RNS meghatározására nem mindig bizonytalanul mutatja a betegség képét, néha pontatlanságok megengedettek és mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot végezni.

A mutatók normája

A vizsgálat eredményeiben a vírusos hepatitis C-re adott JgM ellenanyagok hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei a C-vírus ellenanyagainak jelenlétére utalnak, és ez a normál tartományon belül van. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Ezt az elemzést a kezelés után megismételjük a tényleges gyógyulás megerősítése céljából.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség ugyanakkor akutan vagy krónikusan, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítjük, az elemzés azt jelzi, hogy a kezelés eredményeit a fellendülés során értük el. A diagnózisban csak rendkívül ritkán találtak hamis pozitív eredményeket. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

A vérvizsgálat költsége és a hepatitis C-re vonatkozó PCR

A hepatitis C gyulladásos patológia, melyben a májsejtek érintettek. A betegség a hepatitis C vírus (HVC) emberi testbe való behatolása következtében alakul ki.

A betegség formája lehet akut vagy krónikus.

Leggyakrabban, tünetei akut formái betegség, a betegek többsége nem áll rendelkezésre, néha a betegség kíséri hasi fájdalom, csökkent teljesítményt, nagyobb fáradtságot, étkezési rendellenesség, sötét árnyalatú vizelet elszíneződése széklet, sárgulási a bőr és a nyálkahártyák, ízületi fájdalom. Ezek a tünetek rendszerint 6-8 héttel a fertőzés után jelentkeznek, de hat hónap elteltével jelentkezhetnek.

Az ilyen jelenségek kialakulásával kapcsolatba kell lépni egy egészségügyi intézménnyel, és át kell vizsgálni az egész szervezetet. Az orvosi vizsgálat részeként a hepatitis C vérvizsgálatát végezzük.

Napjainkban a modern diagnosztikai technikák segítségével ez a patológia a fejlődés kezdeti szakaszában azonosítható, ami nagymértékben növeli a betegség teljes kúrájának esélyeit.

A hepatitisz C teszteléséhez a következő embercsoportok szükségesek:

• nők a gyermek viselésének időszakában;
• a hepatitis jelei;
• orvosi személyzet;
• potenciális szervek és véradók;
• a kábítószerfüggők, a HIV-fertőzöttek, az átgondolt intim élet.

A szükséges tanulmányok listája

Milyen vizsgálatokat kell tennie a hepatitis C-hez? A betegség pontos diagnosztizálásához, az okok azonosításához és a máj parenchyma állapotának meghatározásához a következő vizsgálatok szükségesek:

• általános vizelet és vérvizsgálatok;
• a vér biokémiai elemzése;
• PCR analízis;
• vérvizsgálat a HVC elleni antitestek kimutatására;
• vérvizsgálat a saját májsejtjeinek meglévő antitestjeihez;
• májbiopszia.

A hepatitis C vérvizsgálatát szakorvos végzi. Minden egyes vizsgálati módszert részletesebben meg kell vizsgálni, valamint meg fogjuk érteni, hogy a hepatitis C melyik analízise a legpontosabb.

Általános elemzés

A hepatitis C általános vérvizsgálatának elvégzéséhez kiértékelheti a beteg állapotát. A vérparaméterek változásait nem érzékelik a májgyulladás specifikus tünetei, azonban ennek a betegségnek a következményei vannak:

• a hemoglobin, a vérlemezkék és a leukociták csökkent koncentrációja;
• növeli a limfociták tartalmát;
• a véralvadást megszegik;
• a vörösvértestek ülepedési aránya (ESR) növekszik.

A vizelet általános analízise lehetővé teszi az urobelin összetételének detektálását - a májműködés meteorikus működéséből adódó vizeletben előforduló epefesték.

Biokémiai analízis

A hepatitis C vérének biokémiai analízise lehetővé teszi az ilyen rendellenességek azonosítását, mint:

• emelkedett májenzimszintek (alanin transzamináz - ALT és aszpartát aminotranszferáz - AST), amelyek a vérbe jutnak, amikor a hepatocyták sérülnek. Normális állapotban a férfiaknak ezek a mutatók nem haladhatják meg a 37 NE / l-t, a nőknél - legfeljebb 31 NE / l. Az ALT és az AST fokozott koncentrációja tünetmentes hepatitis C-ben gyakran az egyetlen tünete ennek a betegségnek. Ezenkívül a vérglutamil-transz-peptidáz alkalikus foszfatáz fokozódik (általában nem haladja meg a 150 NE / l-t).
• a bilirubin tartalom (mind általános, mind közvetlen) a vérben meghaladja. Ha a szérum sárga pigmentszintje meghaladja a 27-34 μmol / l-t, sárgaság jelentkezik (legfeljebb 80 μmol / l enyhe formában, 86-169 μmol / l - mérsékelt, 170 μmol / l fölött - súlyos formában).
• Az albumin szintje csökken, a gamma-globulinok koncentrációja ellenkezőleg növekszik. A gamma globulinok immunglobulinokból állnak - antitestek, amelyek védik a szervezetet a betegségeket okozó anyagokkal szemben.
• a trigliceridek koncentrációja a vérben.

PCR teszt

A PCR technikával lehet diagnosztizálni a betegség kórokozóját. Az elemzés elvégzése lehetővé teszi a vírus kimutatását a vérben, még akkor is, ha annak mennyisége minimális. A hepatitis C PCR-analízise lehetővé teszi a meglévő fertőzés meghatározását már a fertőzés időpontjától számított 5 nap elteltével, vagyis az antitestek megjelenése előtt.

Ha a hepatitis C által PCR-vel végzett vérvizsgálat eredménye pozitív, ez azt jelzi, hogy a szervezetben aktív fertőzés van. Ezzel a módszerrel végezhet kvalitatív és kvantitatív vizsgálatot a HVC RNS-ről.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi analízise során lehetséges az emberi szervezetben meglévő vírus kimutatása.

Ezt a diagnosztikai eljárást akkor kell elvégezni, ha anti-HVC-t észlel a vérben.

A hepatitis C elemzésének megfejtése azt jelenti, hogy fertőzést vagy kimutatták vagy nem észleltek a szervezetben. Normális esetben nincs patológiás anyag a vérben.

Ha a hepatitis C teszt pozitív, akkor azt jelenti, hogy a kórokozó folyamatosan osztja és fertõzi a májsejteket.

Az elemzés eredményei megbízhatatlanok lehetnek, az alábbi esetekben lehetséges:

• szennyezett biomassza;
• heparin jelenlétében a vérben;
• a vizsgált bioméretumból kémiai vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenlétében, amelyek befolyásolják a PCR elemeit.

A hepatitis C mennyiségi elemzése a vérben található vírus mennyiségére vonatkozó információt szolgáltat, azaz meghatározza a vírus terhelését. Ez a koncepció a vérben jelenlévő HVC-RNS mennyiségét jelenti (például 1 ml-ben). A hepatitis C mennyiségi elemzésének értelmezésében ez az érték digitális IUU-ban kifejezve, IU / ml-ben mérve.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-vét a terápiás intézkedések előtt kell bevenni. Az elemzést az 1., 4., 12. és 24. héten végezzük. A 12. héten végzett vizsgálat indikatív, és az orvosi eljárások hatékonyságának értékelésére kerül sor.

Ha a hepatitis C terhességi vizsgálata pozitív, és a vírusterhelés értéke meghaladja a kórokozóknak a beteg anyától a gyermekig terjedő többszörözésének kockázatát. Továbbá, a vírusterhelés emelkedett értékeivel a terápiás intézkedések végrehajtása nehéz.

A hepatitis C tesztek átiratának megfelelően, ha a vírusterhelés meghaladja a 800 000 NE / ml-t, akkor magas. Ha a számok 400 000 NE / ml alatt vannak, a vírusterhelés szintje alacsony.

A hepatitis C PCR általi elemzését a legpontosabbnak tekintik, és számos előnnyel rendelkezik, mint más kutatási lehetőségek:

• a betegség kórokozójának közvetlen diagnosztizálása. A hagyományos vizsgálatok elvégzését olyan fehérje markerek jelenléte határozza meg, amelyek a kórokozók hulladéktermékei. Ez csak azt jelzi, hogy a fertőzés jelen van a vérben. Ha a hepatitis C-t PCR-vel teszteljük, meg lehet határozni a veszélyes patológia kórokozójának típusát.
• a technika sajátossága. Ezen eljárás során egy egyedülálló DNS-régiót határozunk meg a bioméret során, amely csak egyfajta kórokozónak felel meg. Ez minimálisra csökkenti a hamis eredmények valószínűségét.
• nagy érzékenység. A PCR-analízis során felismerhető a vírus minimális mennyisége. Ez akkor fontos, ha feltételesen patogén anyagokat azonosítanak, amelyek csak akkor jelentenek veszélyt, ha azok szintje nő.
• Ha ezt a technikát alkalmazzuk a bioméret egyik mintájára, akkor több kórokozót lehet kimutatni egyszerre.
• észlelheti a rejtett fertőzéseket. Ezenkívül az analízis lehetővé teszi a kórokozó mikroorganizmusok diagnosztizálását, amelyek a sejteken belül élnek, és magas antigén variabilitással rendelkeznek.

Ha a vizsgálati eredmények pozitívak, akkor a vírus nyomai megtalálhatók a biométernél, akkor a hálózatnak van fertőzése a szervezetben.

A hepatitis C-re vonatkozó negatív PCR-analízis azt jelenti, hogy a bioméretben nincs fertőzés nyoma.

Immunológiai vizsgálat

Ez a módszer lehetővé teszi, hogy azonosítsa az összes típusú hepatitis vírus ellenes antitestjét, valamint a saját testének májsejtjeinek ellenanyagait, amelyek megjelenése hozzájárul az autoimmun hepatitisz kialakulásához.

A vizsgálat során kapott eredmények 3 hónapig relevánsak, akkor újra kell adni vért a hepatitis C-re.

Különleges tesztcsíkok használatával is végezhetünk expressz vizsgálatot. Ez az elemzés lehetővé teszi a vér és a nyál összetételében a C-vírus elleni antitestek meghatározását, ez az eljárás önállóan, otthon végezhető el.

Máj biopszia

Az ilyen elemzés elvégzéséhez a máj parenchima elemét veszik, és a kapott bioméret szövettani vizsgálata megtörténik. Ez lehetővé teszi a test állapotának felmérését: a gyulladásos, nekrotikus fókuszok, a fibrózis stádiuma és így tovább.

Ma a máj parenchima szövettani elemzését helyettesítő teszteket alkalmazzák.

A májkárosodás és a gyulladásos folyamat intenzitásának felmérése érdekében specifikus vénás vér biomarkereket alkalmaznak. A FibroTest használatával felmérheti a szálas szövetek növekedésének mértékét.

Az Actitest elvégzése során információt kaphat a kóros folyamatok intenzitásáról a máj parenchyma során. A Steatototesta segítségével a máj zsírszövetét diagnosztizálhatja, és felmérheti a folyamat mértékeit. A Fibromax az összes fenti vizsgálatból áll, és tartalmazhat néhány más vizsgálatot is.

A tanulmány elkészítése

Milyen vizsgálatokat végeztek a hepatitis C-ben és hogyan fedezték fel ezt a vagy az ilyen típusú kutatást. Ugyanilyen fontos tudni, hogyan kell felkészülni az elemzésre.

A megbízható eredmények elérése érdekében ajánlatos betartani a következő követelményeket:

• A hepatitis C teszteket reggel, üres gyomorban kell bevenni. Legutóbb az ételt kell fogyasztani legalább 8 órával a vizsgálat előtt.
• A biomassza gyűjthető nappal vagy este. Ebben az esetben fontos, hogy legalább 5-6 óra haladjon át az utolsó étkezés és az elemzés között.
• mielőtt a hepatitis C vérét adományozná, a teát, kávét, gyümölcslevet vagy más italokat el kell dobni, csak a víz megengedett.
• A vizsgálat előtt 48 órával ki kell zárni a zsíros, sült ételek és az alkoholtartalmú italok használatát.
• legalább egy órával az elemzés előtt meg kell tartózkodnia a dohányzástól.
• az elemzést nem szabad ultrahang, instrumentális, röntgenvizsgálat, masszázs vagy fizioterápia után azonnal elvégezni.
• egy nappal a vizsgálat végrehajtását megelőzően, ki kell zárni a gyógyszeres kezelést és az intenzív fizikai aktivitást. Az érzelmi stressz ellenjavallt is.
• Ajánlatos 15 percet tölteni a vizsgálat befejezése előtt nyugodt állapotban.

Végezze el a vérgyűjtési eljárást

Hol lehet tesztelni a hepatitis C-t? A bioméret további vizsgálatokra történő mintavételét orvosi intézmény laboratóriumában vagy a beteg otthonában végzik.

A vér vénából a következőképpen történik:

• a páciens alkarján körbevett speciális torzítás segítségével megállítja a vénás véráramlást. Az ilyen manipulációknak köszönhetően a vénák vérrel töltve és láthatóbbak lesznek, ami nagymértékben megkönnyíti a tű behelyezésének folyamatát.
• a bőr területét, ahol a tűt behelyezzük, gondosan kezeljük alkohollal vagy alkohol tartalmú folyadékkal.
• A tűt gyengéden behelyezzük a vénába, majd hozzáerősítünk egy kémcsövet, amelyet kifejezetten vért gyűjtünk.
• Közvetlenül a tű beillesztése után a szorítóköteg eltávolításra kerül a beteg karjáról.
• miután az elemzéshez szükséges vérmennyiséget összegyűjtöttük, a tűt finoman eltávolítjuk a vénából.
• az injekció beadásának helyén steril pamutszövet vagy gézpárnát kell felszívni.
• a hematóma előfordulásának megakadályozásához a tampont néhány erőfeszítéssel kell megnyomni a tű behelyezésére, a karot a könyökcsuklóra kell hajlítani, és ebben a helyzetben néhány percig tartani. Az ilyen intézkedések segítik a vért gyorsabban leállítani.

Feltéve, hogy a belső kezelés technikája jó, ez az eljárás teljesen biztonságos és nem okoz fájdalmas érzéseket.

Ritka esetekben, vérvételt követően a vénák megduzzadhatnak. Ezt a jelenséget "flebititisnek" hívják. A tömörítés (nem forró) segít megoldani a problémát, naponta többször kell alkalmazni a bőr duzzadt területére.

Bizonyos problémák fordulhatnak elő, ha vérzési rendellenesség alakul ki. Az aszpirin, a warfarin és egyéb vérhígítók alkalmazása vérzést okozhat. Ezért az elemzés elvégzése előtt meg kell tagadni a gyógyszerek szedését. Ha a kezelést nem lehet törölni, tájékoztassa a szakembert.

Dátumok és árak

Mennyit tesztelnek a hepatitis C-re? A hepatitis vérvizsgálatának eredménye néhány óra alatt, néhány nap alatt (általában legfeljebb 8 napig) készen áll. Az eredmények elkészítésének időtartama függ a vírus típusától és a választott analitikai módszertől. A gyorsabb a PCR módszer által végzett vizsgálat. Az eredmények ebben az esetben pár órán belül készen állnak.

Mennyibe kerül a hepatitis C teszt? A klinikától és a vizsgálat összetettségétől függően az eljárás ára 400 és 11 000 rubel között változhat.

Tudnia kell, hogy a HVC-hez szükséges mennyiségű antitest létrehozása több hétig is eltarthat. Ezért a patológia kialakulásának korai szakaszában a vizsgálat eredménye hamis negatív lehet.

Ezen túlmenően a nem megbízható adatok beszerzése rossz minőségű elemzéssel és a megszerzett bioméret szállítási feltételeinek megsértésével lehetséges (a mintákat a laboratóriumba kell vinni maximum 2 órával a vérmintavétel után).

Ha a vizsgálat eredménye pozitív, akkor azonnal vegye fel a kapcsolatot egy fertőző betegséggel foglalkozó orvossal. A szakember további vizsgálatot végez, és előírja a megfelelő kezelést.

PCR analízis végrehajtása a hepatitis C-ben és az eredmények dekódolása

A hepatitis C PCR analízis olyan vizsgálat, amelynek fő célja az okozati szer genetikai anyagának azonosítása. Az elemzés a polimeráz láncreakció alkalmazásával tárja fel a betegség kórokozóját. Ez a diagnózis magas fokú pontossággal, specifitással rendelkezik a vírusfertőzés hiányának vagy jelenlétének kimutatására.

A diagnózis lényege

A páciens hepatitis C vírusának meghatározására szolgáló PCR-analízis elvégzéséhez vénás vért veszünk, amely potenciálisan tartalmazza a kívánt vírus RNS (ribonukleinsav) HCV-ét.

A hepatitis C PCR-vizsgálata magában foglalja az eljárást, amikor a következőket adják a beteg vér részecskéihez:

• láncindítók (a szükséges gén rövid mesterségesen szintetizált régiói);
• speciális enzim (RNS polimeráz).

Miután a biológiai anyag gyűjtését laboratóriumba küldik. A vér egy része szükséges a közvetlen PCR analízishez, a második az ELISA módszerrel kerül a vizsgálatba. Az enzim rövid idő alatt képes a kórokozó vírusának genetikai anyagának növelésére. Egy speciális berendezésben több ciklus hő- és hűtési folyamatot hajtanak végre. A végső szakaszban a kapott anyagot összehasonlítjuk a vírus génjeivel, és következtetés születik arról, hogy a páciens testében jelen van-e vagy sem.

A PCR analízis lényege és magatartása a laboratóriumban. A SiberianMedicalLaboratory filmje.

A kutatás típusai

Háromféle diagnosztika létezik, amelyek lehetővé teszik a hepatitis C vírus jelenlétének meghatározását az emberi szervezetben:

• genotipizáláshoz;
• minősége;
• kvantitatív.

Minőségi módszer

A hepatitis C kvalitatív módszerrel történő diagnosztizálása olyan betegek esetében alkalmazható, akiknél a vírus ellenanyaga kimutatható a vérvizsgálatban. A HCV RNS akut fázisának jelenlétében ilyen diagnosztikai lépések lehetővé teszik a betegség jelenlétének megállapítását a fertőzés után 1-2 héten belül. Ezen időszak alatt a hepatitis C elleni antitestek még nem fejleszthetők ki.

Kvantitatív módszer

Kvantitatív diagnosztikai módszert alkalmaznak a vírus koncentrációjának meghatározására vérmintákban. A viremia ilyen vizsgálata (koncentrációfok) lehetővé teszi a vírus RNS-egységek számának pontos meghatározását. A végeredmény a megfelelő térfogatban fejeződik ki. Ha kvantitatív elemzésről beszélünk, akkor az indikátorokat 1 ml-ben (1 köbméter) mérjük.

A vírusterhelés paraméter a betegség fertőzőképességének szintjét jelenti, vagyis a beteg fertőzőképességének mértékét tükrözi. A gyakorlatban ez azt jelenti, hogy minél nagyobb a vírus koncentrációja a vérben, annál nagyobb esély van arra, hogy a páciens megfertőzi a hepatitis C-t. A kvantitatív kutatási módszer lehetővé teszi az elvégzett kezelés minőségének és hatékonyságának megállapítását is.

genotipizáláshoz

A genotipizálás a betegség kórokozójának mutációit tárja fel. A kezelési terv előírása előtt meghatározzák a vírus genotípusát: a kezelés minősége és időtartama attól függ. Például az I típusú betegség kezelésében a hatásfok 60%, II., III. Típusú - körülbelül 80%.

A hepatitis PCR analízis előnyei

Az eljárás fő előnyei közé tartoznak a következők:

1. A korai diagnózis lehetősége. A PCR-analízis képes felismerni a vírus jelenlétét a fertőzés korai szakaszában.
2. Alacsony hibaüzenet. A vizsgált biológiai erőforrás lehetővé teszi a genetikai anyag egy részének diagnosztizálását, amely csak egyfajta vírusfertőzésre jellemző. Ez a körülmény lehetővé teszi a hamis diagnosztikai eredmények megelőzését.
3. Nagyfokú érzékenység. A PCR analízis képes kis mennyiségben kimutatni az RNS vírust, ami lehetővé teszi a látens fertőzések időben történő nyomon követését.

Indikációk a

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-vizsgálat szükséges, ha rendelkezésre áll:

• betegekkel való kapcsolatfelvétel, amely fertőzéshez vezethet;
• a májcirrózis tünetei (a lép megnagyobbodása, a máj méretének nem jellemző alakváltozása, a vénás plexus kimutatása a has alatti bőrön);
• az ELISA pozitív eredményei;
• az AST és ALT fokozott aktivitása (a vér biokémiai analízisében nyilvánul meg);
• a vírusellenes terápia vezetésének szükségessége;
• a kezelés kezdeti szakasza a vírus terhelésének megállapításához;
• végezzük el a terápia végső szakaszát a lehetséges recidíva megszüntetése érdekében;
• a hepatitis B jelenléte a betegben, hogy kizárja a kevert májkárosodás kialakulását.

Hogyan kell felkészülni a véradásra a PCR vizsgálatokhoz?

A PCR-elemzés előkészítése a következő ajánlásokat tartalmazza:

• reggel vért veszünk;
• az elemzést üres gyomorra végezzük, ezért tanácsos egy szünetet tartani a legutóbbi 8-10 órás étkezés között;
• a diagnózis előtt néhány nappal ki kell zárni a zsíros, fűszeres és sült ételeket, az alkoholtartalmú italokat és a dohányzást;
• egy nappal az elemzés előtt meg kell tartózkodnunk a nehéz fizikai erőfeszítésektől, kizárva az órákat az edzőteremben vagy az úszómedencében.

Elemzési eredmények: normák és eltérések

Maga az elemzés nem sokáig folyik, és a magasan képzett szakember hepatológus vagy fertőző betegség szakember dekódolja a hepatitis C PCR eredményeit. Az elemzés eredményei alapján diagnosztizálják a pácienst.

A felmérés eredményeinek helyes megfejtése érdekében a következő mutatókat veszik figyelembe:

• a vér biokémiai elemzése;
• ultrahangos adatok;
• biopsziás eredmények.

A kvantitatív elemzés értelmezése

A PCR mennyiségi elemzés eredményeinek megszerzése során figyelembe veszik a következő mutatókat:

Basic Hepatitis C tesztek

A vírusos hepatitis C súlyos egészségügyi és szociális probléma. Jelenleg 180 millió ember van jelen a világon, évente 350 ezer ember hal meg. A hepatitis C hosszú látens (tünetmentes) folyamata késői diagnózishoz vezet. A hepatitis C elemzését a betegség diagnosztizálása, a differenciáldiagnózis segítségével végezzük el, meghatározzuk a korábban átadott "álló" betegséget. A vizsgálatot a hepatitis C tüneteivel rendelkező betegeknél, a májenzimek emelkedett szintjén, a korábban átadott hepatitisz nem specifikus etiológiájával, a veszélyeztetett személyekkel és a szűrővizsgálatokkal kapcsolatos információk megszerzésében alkalmazzák.

A hepatitis C diagnózisát 2 szakaszban végzik el:

1. szakasz A hepatitis C vírus (anti-HCV) elleni antitest szérumban való jelenlétének meghatározása.

2. szakasz Anti-HCV jelenlétében RNS (ribonukleinsav) jelenlétét vizsgálják PCR-rel hepatitis C-re. A vizsgálat lehetővé teszi a folyamat "aktív / inaktív" szakaszának azonosítását a kezelés szükségességének megoldására. Ismeretes, hogy a hepatitis C vírussal fertőzött személyek mintegy 30% -a megszabadul a fertőzéstől, mivel erős immunrendszere van, és nem igényel kezelést. A PCR használatát a vírus genotípusa határozza meg. A különböző genotípusok eltérő módon reagálnak a kezelésre.

A májkárosodás mértéke a hepatitis C-ben biopszia vagy egyéb invazív és nem invazív (például fibrotest) tesztekkel határozható meg. A máj steatosis fokát steatotesta határozza meg. A hepatitis C diagnózisának minden esetben az epidemiológiai vizsgálat adataiból, a betegség klinikájából és a biokémiai vérvizsgálatokból származó adatokon kell alapulnia.

Ábra. 1. A vírusos hepatitis C súlyos hatásai - intenzív ascites.

Hepatitis C teszt: anti-HCV

Az anti-HCV antitestek (anti-HCV) a fertőzés specifikus markerei. A beteg testében specifikus antitesteket állítanak elő a hepatitis C vírus (antigének) - az IgM és IgG (anti-HCV IgM / IgG) immunglobulinok fehérjéihez.

A hepatitis C vírus elleni antitestek pozitív eredményének kézhezvételekor megerősítő vizsgálatot végeznek - a vírus szerkezeti és nem strukturális fehérjéinek teljes ellenanyagainak meghatározása. Az E1 és E2 vírusok szerkezeti burokfehérjéit az anti-HCV IgM, a nukleokapszid C-cor (anti-HCV IgG) fehérjék és az NS-anti HCV NS IgG nem strukturális fehérjék-enzimjei termelik.

A hepatitis C vírus elleni antitestek kimutatására enzimkötéses immunszorbens vizsgálatot (ELISA) alkalmaznak. Megerősítő vizsgálatok - RIBA (rekombináns immunoblotting), ritkábban Inno-Lia (szintetikus peptidek analízise) használják az ELISA eredményeinek megerősítésére (+).

Anti HCV IgM

• A HCV IgM antitestek a szérumban a fertőzés után 4-6 héttel jelennek meg, és gyorsan elérik a maximális értéket. Az akut folyamat végén (5-6 hónap elteltével) koncentrációjuk csökken.
• Az anti-HCV IgM jelenlétének hosszú távú nyilvántartása azt jelzi, hogy a hepatitis C krónikus folyamatot szerzett.
• Az IgM szintjének emelkedése a krónikus hepatitisz C időszakában azt sugallja, hogy a fertőző folyamat újraaktiválódik.
• Az IgM immunglobulin szintje lehetővé teszi a kezelés hatékonyságának felmérését.

Anti HCV IgG

A HCV IgG antitestek a beteg szérumában 11-12 héttel a fertőzés után jelentkeznek. 5-6 hónap alatt a csúcskoncentrációt rögzítjük. Következő antitestek

állandó marad a betegség egész ideje alatt az akut időszakban és a helyreállítási időszak alatt.

A hepatitis C vírus összes antitestje

A hepatitis C vírus (anti HCV összesen) összes antitestét használják a "friss" betegségek diagnosztizálására. Az összes antitest a nukleokapszid C-cor (anti HCV IgG) és 7 nemstrukturális NS protein enzim (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, HCV NS4 és anti HCV NS5 elleni ellenanyagok.

A hepatitisz C vírus összes ellenanyaga a fertőzött személy szérumában a fertőzés kezdetétől számított 11-12 hét elteltével jelentkezik, 5-6 hónapos csúcsot ér el, és állandó szinten tartja a betegség teljes időszakában az akut időszakban és a helyreállítási időszak után 5-9 évig.

Az antitestek mindegyikének független diagnosztikai értéke van:

• Az antiHCVC (cor) a hepatitis C-vel való érintkezés fő mutatói.
• Az AntiHCVNS3 a szerokonverzió folyamatában (az antitestek termelését a vírus jelenlétére reagálva) mutatta ki, jelzi a fertőző folyamat súlyosságát és magas vírusterhelést jelez. Segítségükkel az örökletes hepatitis C-t olyan betegeknél határozzák meg, akik nem feltételezik, hogy fertőzöttek. Az anti-HCV NS3 hosszú távú jelenléte a szérumban magas folyamatveszélyt jelez.
• Az AntiHCVNS4 azt sugallja, hogy a fertőző folyamatnak hosszú ideje van. Az antitest titerek szintjét a májkárosodás mértékében lehet megítélni.
• Az AntiHCVNS5 a virális RNS jelenlétét jelzi. Az akut időszakban elért felfedezés a folyamat krónikusságának előfutára. A kezelés hátterében magas antitest titerek azt sugallják, hogy a beteg nem reagál a kezelésre.
• AntiHCVNS4 és antiHCVNS5. Az ilyen típusú antitestek a hepatitis kialakulásának késői szakaszában jelennek meg. Csökkentésük a fertőző folyamat remissziójának kialakulását jelzi. A kezelést követően az anti-HCV NS4 és az anti-HCV NS5 titere 8-10 év alatt csökken. Az ilyen típusú antitestek nem védenek az újbóli fertőzés ellen.

Ábra. 2. A máj makrodrugája. Májcirrózis hepatitis C-ben

Dekódolás analízis hepatitis C-re

A hepatitis C vírus elleni antitestek hiányát a "norm" kifejezés jelzi. Ez azonban nem mindig jelenti a betegség hiányát az emberben. Tehát a fertőzött személy vérében lévő antitestek hiányát a vérben való megjelenésig rögzítik - a fertőzés pillanatától számított 6 hónapig (átlag 12 hét). A fertőzött személy vérében lévő antitestek távollétét "szerológiai ablaknak" nevezik. A 3. generációs tesztrendszerek (ELISA-3) nagyfokú specifitással rendelkeznek (akár 99,7%). Körülbelül 0,3% -uk hamis pozitív eredményeket hozott.

Az anti-HCV jelenléte a jelenlegi fertőzést vagy múltbeli fertőzést jelzi.

• Az IgM antitestek és az anti HCV Cor Cor IgG kimutatása, az anti HCV CorE IgG titerének növekedése és az (+) PCR eredményei az akut hepatitisz klinikai és laboratóriumi tüneteinek jelenlétére utalnak.
• Az anti-IgM, az anti-HCV Coré IgG, az anti-HCV NS IgG és a (+) PCR kimutatása a hepatitis klinikai és laboratóriumi jeleinek jelenlétére utal, ami a krónikus hepatitis C újraaktiválódását jelzi.
• Az anti-HCV Coré IgG és anti-HCV NS IgG kimutatása a hepatitis klinikai és laboratóriumi jelei és a negatív PCR eredmény hiányában azt jelzi, hogy a betegnek krónikus hepatitis van a látens fázisban.

Ábra. 3. Májrügy. Elsődleges májrák. Az onkológia kialakulásának egyik oka a krónikus hepatitis C hátterében kialakult máj cirrhosis.

PCR analízis a hepatitis C-re

A polimeráz láncreakció (PCR) az "arany standard" a vírusos hepatitis C diagnózisához. A vizsgálat nagy érzékenysége lehetővé teszi a vírusok genetikai anyagának (RNS) kimutatását még akkor is, ha csak néhányan szerepelnek a vizsgált anyagban. A PCR képes érzékelni az RNS vírusokat a szérumban az antitestek megjelenése előtt, de nem korábban, mint a fertőzés pillanatától számított 5. napon. Ha a betegséget PCR-rel detektálják, az RNS-vírusokat nemcsak a szérumban, hanem a máj biopatákban is kimutatták.

• A polimeráz láncreakció lehetővé teszi a hepatitis C vírusok jelenlétének vagy hiányának meghatározását a vérben, és dönt a kezelés megkezdéséről. Ismeretes, hogy a betegek legfeljebb 30% -a megszabadul a fertőzéstől, mivel erős immunrendszere van, és nem igényel kezelést.
• A hepatitis C PCR-t a kezelés hatékonyságának monitorozására használják.
• A PCR-t antitestek hiányában alkalmazzák a vérben, de hepatitis C erős gyanúja (fokozott alkalikus foszfatáz szint, teljes bilirubin, máj enzimek AST és ALT 2-szerese).
• A hepatitis C-re vonatkozó PCR-elemzést hepatitis vírusok intrauterin átvitelének szabályozására használják.

Hepatitis C virális terhelés

A PCR-analízis segítségével nemcsak a vírus RNS jelenlétét lehet meghatározni a vérben - kvalitatív analízis (észlelt / nem detektálható), de számuk - a vírus terhelés (a vírus RNS egységeinek száma 1 ml vérben). A hepatitis C kezelés hatékonyságának monitorozására kvantitatív mutatószámot alkalmaznak.

A PCR-hez alkalmazott módszerek eltérő érzékenységgel rendelkeznek. Az Oroszországi Föderációban a 2014-es módszertani ajánlásoknak megfelelően ajánlott 25 NE / ml vagy annál kisebb érzékenységű módszerek alkalmazása. A 2015-es Májkutatás Európai Szövetségének ajánlásai szerint a virális RNS 15 NE / ml-es érzékenységgel történő meghatározására javasolt módszereket alkalmaznak.

A vizsgálati rendszer érzékenységétől függően a páciens a vizsgálat egyik vagy másik eredményét kapja:

• A COBAS AMPLICOR analizátor minimális érzékenysége 600 NE / ml (a régi generációs analizátor).
• A HCB-TEST COBAS AMPLICOR analizátor minimális érzékenysége 50 NE / ml, amely 100 példány / ml.
• A HCV RealBest RNS analizátor minimális érzékenysége 15 NE / ml, ami 38 példány / ml (a modern vizsgálati rendszerek csoportjába tartozik). Ezen elemzők sajátossága 100%. Segítségük szerint 1a és 1b, 2a, 2b, 2c és 2i, 3, 4, 5a és 6 altípusú hepatitis C vírusokat észleltek.

Ha az analizátor érzékenységi küszöbértéke alatt RNS másolatok vannak, a beteg megkapja a "nem észlelt" választ.

Ábra. 4. Példa a PCR analízisre (kvantitatív teszt). A vírusterhelést a hepatitis C-re határozták meg.

A hepatitis C PCR analízis eredményeinek értelmezése

• Az RNS-vírus hiánya a fertőzés hiányát jelzi.
• Az antitestek vérben való jelenléte elleni RNS hiánya azt jelzi, hogy a hepatitis C vírus eltűnt a kezelés hatására vagy öngyógyító hatással.
• Bizonyos esetekben a vírus jelen van a vérben, de alvilági szinten, amikor a koncentrációját nem rögzítik az analizátorok. Az ilyen betegek továbbra is veszélyesek a fertőzés szempontjából.
• Az RNS vírus kimutatása hat egymást követő hónapban akut hepatitisz C-ben szenvedő betegeknél azt jelzi, hogy a betegség krónikus folyamatba került.
• A vírus RNS csökkentése a kezelés alatt a terápia hatékonyságát jelzi, és fordítva.

Ábra. 5. Zsíros hártya. A májkárosodás egyik oka a vírusos hepatitis C.

A hepatitis C alapvető biokémiai vérvizsgálata

A biokémiai vérvizsgálatok számos emberi szerv és rendszer funkcionális állapotát segítik elő.

Májenzimek ALT és AST

A májenzimeket intracellulárisan szintetizálják. Ők részt vesznek az aminosavak szintézisében. Sokuk megtalálható a máj, a szív, a vesék és a vázizmok sejtjeiben. A szervek vereségével (a sejtmembránok integritásának megsértésével) az enzimek bejutnak a vérbe, ahol szintjük emelkedik. Az enzimek emelkedett szintjét a májsejtek vereségével (lízis, destrukció), myocardialis infarktus és egyéb betegségek regisztrálják. Minél nagyobb a szérum transzamináz szintje, annál több sejtet pusztítottak el. Az ALT dominál a májsejtekben, az AST - miokardiális sejtekben. A májsejtek megsemmisítésével az ALT szintje 1,5-2-szer nő. A myocardium sejtek megsemmisítésével az AST szintje 8-10-szer nő.

Krónikus vírusos hepatitis diagnosztizálásakor figyelmet kell fordítani az AST / ALT arányra (de Ritis-együttható). Az AST feletti AST túlzott mértékű májkárosodást jelez.

• Az AST férfiakra vonatkozó normája 41 egység / l, nők - akár 35 egység / l, 12 év feletti gyermekek - akár 45 egység / l.
• Az ALT normája a férfiak számára akár 45 egység / l, a nők - legfeljebb 34 egység / l, gyermekek 12 éves és idősebb - akár 39 egység / l.
• Normálisan (egészséges emberekben) az AST / ALT arány 0,91-1,75 között van.

bilirubin

A bilirubin a hemoglobin lebomlása. A bilirubin a vérben közvetett (akár 96%) és közvetlen (4%) formájában található. Az anyag bomlási folyamata elsősorban a máj sejtjeiben jelentkezik, ahol az epével ürül ki a szervezetből. A májsejtek megsemmisítésével a bilirubin szintje nő a szérumban. Általában a teljes bilirubinszint kevesebb, mint 3,4 - 21,0 μmol / L. 30-35 μmol / l vagy annál magasabb szinten a bilirubin behatol a szövetekbe, melynek következtében a bőr és a sclera enyhevá válik.

Ábra. 6. Ha a vérben lévő hepatitis C fokozza a bilirubinszintet. Az anyag behatol a szövetekbe, ezért a bőr és a sclera kóstolt.

PCR diagnosztika a hepatitis C-re

A hepatitis C a májsejtek gyulladása, amely a HCV vírus (hepatitisz C) fertőzésének következménye, a fertőzött személy vérével való érintkezés révén következik be. A flavivírus HCV genetikai kódját a vírus szerkezetében található RNS (ribonukleinsav) molekula hordozza. Ezt az életveszélyes jelenséget a patológia kezdeti szakaszában titokban tartják. A fertőzés és a tünetek kialakulása közötti időtartam (az immunrendszer válasza) egy hónapról hat hónapra tehető. Rendszerint a betegség krónikus formát ölt és nehéz gyógyítani.

A modern orvostudomány lehetővé teszi a kóros kórképek diagnosztizálását kisebb májkárosodással. A legáltalánosabb és leghatékonyabb diagnosztikai módszerek közé tartozik a PCR analízis. Tekintsük ebben a cikkben, hogy mi ez és mi létezik.

Mi a vizsgálat?

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis egy laboratóriumi vizsgálat, amely kimutatja a ribonukleinsav (RNS) genetikai anyagát, a flavirust. Meghatározza a vérben található RNS-molekulák számát, a biológiai anyag minőségét, a HCV flavirus genetikai típusát.

A hepatitis C PCR módszer lehetővé teszi a minimális mennyiségű flavirus kimutatását az antitestek kialakulása előtt, rendszerint a fertőzés után.

A tanulmányt gyakran RNS-analízisnek is nevezik, mivel a flavavírusban lévő 30-60 nm méretű ribonukleinsav részecskéket detektálja.

A vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük: üres gyomor esetén a páciens vért ad a vénából, amelyet különféle módszerek tesztelnek:

• A valós idejű PCR-t zárt automatizált módon hajtják végre, és alacsonyabb határértéket mutatnak az RNV-vírusok kimutatására 15 NE / ml;
• COBAS AMPLICOR 50-100 NE / ml érzékenységgel.

Minél magasabb a diagnosztikai módszer érzékenységének küszöbértéke, annál nagyobb esély van a vizsgált biológiai anyag legalacsonyabb vírustartalmának kimutatására.

Milyen elemzéseket alkalmaznak

A több évtizede sikeresen alkalmazott elemzést PCR hepatitisnek nevezik, és könnyen és gyorsan észlelhető. Az orvostudományban a reakció két módja alapvetően különbözik egymástól:

• kvalitatív módszerrel kimutatható az adott vírus genetikai forrásának biológiai anyagában való jelenléte;
• a mennyiségi elemzés megméri a genetikai anyagok számát, amely lehetővé teszi a patológia stádiumának meghatározását vagy a terápiás kurzus hatékonyságának értékelését;
• a genotípus meghatározza a szervezetben jelen lévő vírus típusát.

Általában a vérvizsgálat segíti a viremia és a kórokozó genetikai típusának azonosítását. A vizsgálatot általában a diagnosztikai rendszer érzékenységének függvényében 1 alkalommal végzik el. Szükség esetén a vizsgálatot ultrahangos reagens alkalmazásával végezzük.

Kiváló minőségű PCR

Mi a hepatitis C magas minőségű PCR RNS? A reakció lényege a hepatitisz RNS szekvencia jelenlétében rejlik, és a reakció csak az ELISA-ban hasonló etimológiájú vírusfehérjék jelenlétében lehetséges. Az összehasonlítás folyamatában a terhelés és a máj terület lehetséges károsodása észlelhető.

Ennek a módszernek az a megkülönböztető jellemzője, hogy képes kimutatni egy külön gén jelenlétét is.

Meg kell jegyezni, hogy a PCR és ELISA tesztek eredményeinek beérkezését követően a betegnek megfelelő kezelésre van szüksége, függetlenül attól, hogy a végső enzim immunvizsgálat eredménye. Pozitív fertőzést jelez, és a PCR negatív a vírusrészecskék csökkentett mennyiségét jelzi az érzékenység szintjéhez viszonyítva.

Számos olyan feltétel van, amely negatív PCR és ELISA termelését befolyásolja:

• az anyaggyűjtés megfelelő feltételeinek hiánya;
• a kapott elemzés szennyeződést tartalmaz;
• korai heparin injekció esetén a betegnek.

A páciens részéről nincs szükség a vérminták PCR-elemzésre vonatkozó szabályainak betartására, ebben az esetben az analízis minősége az eljárást végző orvostól függ. A betegség jelenlétének megállapítása (különösen akut formában) a fertőzés után néhány héten belül jelentkezik.

Mennyiségi elemzés

A vírusterhelést a további terápia kialakulása és a test reakciója előtt kvantitatív teszt ajánlott. A vérmintavétel folyamatát hasonló módon végzik, mint a kiváló minőségű PCR és ELISA, az egyetlen feltétel az, hogy nincs lehetőség a dohányzás a beteg előtt az eljárást.

Ami a vizsgálat eredményeként kapott adatok jellemzőit illeti, a megnövekedett terhelést 800000 NE / ml, alacsony - 400000 NE / ml indikátor jellemzi. A vírus jelenléte a páciens testében a PCR jelzi, hogy a hepatitis nem negatív minőségi teszt.

Ez a fajta kutatás lehetővé teszi annak meghatározását, hogy mennyire veszélyes a beteg a körülötte levő emberek számára. Például egy magas szintű azonosítás a páciens fokozott fertőzőképességét jelzi. Ezenkívül az elemzés eredményei segítik a leghatékonyabb kezelés megfogalmazását és meghatározzák, hogy a meglévő terápia milyen hatékonynak tekinthető.

A tesztek gyors negatív válasza jelzi a választott technika sikereit, a lassú pedig a módosítások szükségességét és a különböző kezelések igénybevételét jelzi.

Az analízis eljárásának folyamata a betegség meghatározott napjától függ. Az első meghatározást a beteg kórházba való bejutását követő első napon végezzük, majd az eljárást a gyógyszerek szedése után 4, 12 és 24 héttel megismételjük.

A mennyiségi elemzés tehát azt mutatja, hogy melyik kezelés a leghatékonyabb, a rendelkezésre álló terápia időtartama és a páciens más emberekkel kapcsolatos veszélye.

genotipizáláshoz

Az anyagelemzés vizsgálata során fontos meghatározni a vírus genotípusának pontosságát. Jelenleg a hepatitis C vírus 11 fajtája van, amelyek viszont bizonyos alfajokat tartalmaznak.

Mindezek a fajok eltérő módon reagálnak a különböző kezelésekre, és az egyes fajok teljesen ellenállóak a sok gyógyszerrel szemben.

A genotípus lehetővé teszi a máj állapotának meghatározását és bemutatását. Nem ritka, hogy az eredményeket nem írják be, ami azt jelenti, hogy a vizsgálati rendszer nem érzékeli a páciens vérében lévő vírust. Ez kimutatható, ha egy adott genotípus nem felel meg ennek a zónának. Ebben az esetben az elemzést többször is meg kell tenni, és egy érzékenyebb rendszert használnak az anyag tanulmányozásához.

Ultra-érzékeny módszer

Az ultrahangos módszer bizonyos esetekben szükséges, amikor a hepatitis diagnózisát más módszerrel nem lehet elvégezni, és amikor az elemzést a kezelőorvos határozza meg:

• a hepatitis C vírus jelenlétének gyanúja esetén a betegség látens típusú betegein;
• a hepatitis C vírus ellen irányuló antitestek jelenléte, amelyet nem igazoltak PCR-diagnosztikával;
• annak érdekében, hogy meghatározzák a választott kezelési módszer hatékonyságát, és megerősítsék a betegség megszüntetését.

A módszer érzékenysége jóval magasabb, mint a szokásosnál, azonban ez a módszer nem zárja ki, hogy pozitív és negatív eredményeket kapjunk. Ilyen helyzetben fontos az eljárás minőségének és az anyag szennyezettségének ellenőrzése.

A PCR elemzés magyarázata

Az elemzés dekódolását a bemutatott anyagok alapján végezzük, míg a laboratóriumi vizsgálatok eredményei között szerepelnek bizonyos adatok.

A dekódolás tartalmazhat pozitív PCR polimeráz láncreakciót és negatív ELISA-t a vizsgálatban, ami azt jelenti, hogy a betegnek nincs jele a hepatitis C vérben, de a múltban átvette a betegség akut formáját. Rendszerint a diagnosztika során a szakemberek a PCR tesztmutatók használatát igénylik.

A fentiek összegzésével megállapítható, hogy az elemzés során fontos az összes szabály és ajánlás követése, hogy a kapott eredmények a lehető legpontosabbak legyenek, és a kapott adatok alapján megállapítható az alkalmazott terápia hatékonysága és a teljes gyógyulás további esélye.

PCR analízis a hepatitis C-re

A krónikus vírusos hepatitis C (CVHS) diagnosztizálására a személy átfogó vizsgálatára van szükség, amely magában foglalja a klinikai, laboratóriumi és instrumentális vizsgálatokat. A helyes diagnózis szempontjából fontos a PCR módszer - polimeráz láncreakció.

Mit mutat ez az elemzés és miért van szükség?

Ez a laboratóriumi módszer felismeri a hepatitis C vírus RNS-t az emberi vérben. A vírus elleni antitestekhez enzimkapcsolt immunoszorbens vizsgálattal (ELISA) együtt PCR-t használnak a CVHC diagnózisának és a kórokozójának genotípusának megállapítására. Ez a kutatás a laboratóriumi diagnosztika egyik legújabb módszere. A CVHS megbízhatósága meghaladja a 97% -ot, ami nagyon jó mutató a kutatásnak.

Három vér PCR vizsgálata van a CVHC-nek: minőségi, mennyiségi és vírus genotipizálás. A vírus első vizsgálata (kvalitatív analízise) a vérben kimutatja, ezért csak a diagnózisra használható.

A második (mennyiségi) vizsgálat meghatározza a vírusterhelés mértékét a testen, ezért a terápia hatékonyságának monitorozására használják.

A harmadik PCR (genotipizálás) tisztázza a diagnózist, meghatározva a vírus genotípusát, ami nagyon fontos a helyes antivirális kezelés kijelöléséhez.

A polimeráz láncreakciós technika lényege olyan enzimek alkalmazása, amelyek a patogén genetikai anyagát a biomateriában szaporítják. Az ilyen replikáció folyamatában a csövet vérrel többször felmelegítik, majd lehűtik az enzimatikus reakció gyorsításához szükséges hőmérsékletre. Ezen manipulációk eredményeképpen a vírusgenom mennyisége sokszor megnő, és lehetővé teszi annak minimális mennyiségű kimutatását is.

A PCR-diagnosztika számos előnnyel jár, mint más laboratóriumi vizsgálatok:

• nagy érzékenység - 97-98%;
• garantált analitikai specifitás (pontosan feltárja a kórokozót, amelyet meg akar találni, és nem a kapcsolódó törzs);
• a vezetés sebessége (legfeljebb két napig tart a következtetés levonása).

Háromféle PCR-vizsgálat

Kiváló minőségű PCR-analízist rendelünk minden olyan betegnél, akiknél az ELISA-analízis kimutatta a HVGS vírus ellenanyagát. Kiváló minőségű PCR elvégzése után két választ választható: "RNS detektálható" vagy "RNS nem észlelhető". A vírus minimális mennyiségének kimutatása a vérben legalább 50 NE / ml érzékenységű vizsgálati rendszerek szükségesek. Ha a vírus koncentrációja a páciens vérében kisebb, mint a diagnosztikum, akkor a vizsgálat eredménye hamis negatív lehet. Az ilyen diagnosztikai hibák elkerülése érdekében a PCR diagnosztikát végző laboratóriumoknak nagyon érzékeny vizsgálati rendszerekkel kell rendelkezniük. A "Invitro" laboratóriumban például 15 NE / ml érzékenységű vizsgálatokat alkalmaznak. A laboratóriumi dolgozók kötelesek tájékoztatást adni a vizsgálatok érzékenységéről a betegek és az orvosok kérésére.

A PCR mennyiségi analízise meghatározza a viremia mértékét, vagyis a patogén koncentrációját a vérben, vírus terhelés. A vizsgálat eredményei - ellentétben a jó minõségû PCR-vel - számok, például 2 × 10 * 6 NE / ml, azaz 2 millió nemzetközi egység 1 ml vérben. Egyes laboratóriumok egy másik mutatót használnak - a példányszám / ml. Ez a két mutató könnyen konvertálható: 1 nemzetközi egység 4 példányban RNS. Így 2 × 10 * 6 NE / ml azt jelenti, hogy 8 × 10 * 6 kópiás vírus RNS-t 1 ml-ben, azaz 8 millió példányban 1 ml vérben.

A genotipizálás a vírus hat genotípusának egyikének meghatározása. A klinikai kép, a máj szövődményeinek alakulása és a páciens jövőbeli életében bekövetkező prognózis függ a kórokozó genotípusától. A vírus genotípusa már a diagnózis szakaszában is nagyon fontos, mivel a gyógyszerek kombinációja és a beteg számára kijelölt terápiás kurzus időtartama a helyes meghatározástól függ.

Azonban még ez a látszólag "tökéletes" laboratóriumi kutatás is hátránya:

• a tanulmány megismétli az összes kórokozó genetikai anyagát, még akkor is, ha nem élő, ami torzíthatja az eredményt. Ezért annak érdekében, hogy a PCR segítségével ellenőrizni lehessen a hatékonyságot, a reanalízis legkorábban két hónappal az előző után történt, így a halott vírusok "elhagyhatják" a páciens testét;
• a vírusgenom része, amelyet tesztrendszerekkel határozunk meg, elvileg más vírusokban vagy mikroorganizmusokban is jelen lehet, így hamis pozitív válasz lehet;
• a vírusok gyorsan változnak. Néha a vírusmutáció sebessége és mértéke olyan magas, hogy a tesztrendszer leállítja a genomot. Ennek eredményeként hamis negatív eredmény lehetséges.

E hiányosságok mérséklése érdekében a PCR-diagnosztika laboratóriumi vizsgálati rendszereinek gyártói folyamatosan végeznek vizsgálatokat, beleértve a keresztreakciókat és a vírus egy adott genotípusára való érzékenységet.

Hogyan alkalmazzuk a hepatitis C PCR-tesztet?

Annak érdekében, hogy a PCR-vizsgálat megbízható legyen, szigorúan be kell tartani az elkészítésre vonatkozó szabályokat:

• a kutatást üres gyomoron végzik (glükóz, zsírok, ásványi anyagok, amelyek a vérből táplálkoznak az élelmiszerből, befolyásolhatják az enzimreakció sebességét és minőségét);
• a legutóbbi étkezés és az elemzés céljából végzett vérvétel közötti rés legalább 8 óra legyen;
• a tanulmány előestéjén tilos az alkoholfogyasztás és a zsíros ételek fogyasztása, amelynek elhúzódási ideje elhúzódik;
• egy nappal a laboratórium előtt meg kell akadályoznia az erős fizikai és érzelmi stresszt;
• amíg a vérvétel időpontja nem ajánlott füstölni.

A hamis következtetések megjelenésének elkerülése érdekében az állítólagos páciensnek egy kicsit korábban kell eljutnia a laboratóriumba, mint a vér. 15-20 percet vesz igénybe, hogy egy személy elkapja a lélegzetét, nyugodjon le. Az adrenalin, amely a vérben gyors gyaloglás után van jelen, befolyásolhatja a vizsgálat eredményét.

Ha az elemzésre szánt beteg bármilyen gyógyszert szed, értesítenie kell erről az orvost. Lehetséges, hogy néhányat el kell utasítani egy ideig (ha lehetséges).

A hepatitis C PCR vizsgálatának eredménye

Az eredményeket dekódolni az elemzést végző laboratórium laboratóriumában. A dekódolás a normából kapott eredmény eltérésének meghatározása. A mutatók számát közvetlenül a tesztrendszer gyártója állapítja meg, amelyet a laboratórium a diagnosztika számára használ. Ezért nem meglepő, hogy néhány laboratóriumban a vírusterhelést IU / ml-ben, máshol pedig a másolatokban / ml-ben határozzák meg.

A következtetést követően helyesen kell értelmezni. A vizsgálat eredményeinek kezelését a hepatitis C-ben szenvedő páciens kezelőorvosának kell elvégeznie. A páciens objektív, műszeres és laboratóriumi vizsgálata után az orvos elegendő mennyiségű adatot nyerhet a kapott PCR-eredmények helyes értelmezéséhez.

A kvalitatív elemzés értékelése általában nem okoz nehézséget még a betegek számára sem. Az eredmény csak egy lehet: "észlelt" vagy "nem észlelt". Ebben az esetben a második a norma.

A kvantitatív elemzés indikátorai nehezebbek értelmezni. Megmutatja a vírusterhelés mértékét a betegen. Még a hepatológusok között is nincs egyetértés a detektált viremia kezelésével kapcsolatban. A legtöbb orvos hajlamos arra gondolni, hogy a 8 × 10 * 5 NE / ml-nél nagyobb terhelést kell figyelembe venni. Több mint 1 × 10 * 7 NE / ml terhelést nagyon magasnak tartanak, míg az alacsony terhelés kevesebb, mint 4 × 10 * 5 NE / ml.

A vírusterhelés mértéke a vírus virulenciáját (agresszivitását) sugallja: minél nagyobb a vérben lévő mennyisége, annál gyorsabban fejlődnek a máj szövődményei. A vírus magas koncentrációja a várandós nő vérében növeli annak valószínűségét, hogy behatol a hemato-placentáris gáton keresztül a magzatra. A Viremia hatással van a kezelés hatékonyságára is: az alacsony számban a terápia hatékonysága magasabb, mint a magasaké.

Annak érdekében, hogy biztosak legyünk a hepatitisz C PCR elemzésének pontosságában, csak azokat a laboratóriumoknak kell előnyben részesíteniük, amelyek jól működtek. Az árpolitika ebben az esetben nem játszhat elsődleges szerepet.